Questões de Concurso

Abaixo está representado um vetor plasmidial vendido por empresas de biotecnologia.

Como pode ser observado, o vetor apresenta diversas características que o tornam útil em aplicações biotecnológicas .

1. Tamanho 5,5Kb.

2. Promotor CMV (citomegalovírus) localizado antes do MCS (sítio de clonagem múltiplo).

3. Possui sequências T7 e BGH flanqueando o MCS permitindo o seqüenciamento desta região com iniciadores apropriados.

4. Sítio de poliadenilação de BGH ao final do MCS permitindo a produção de um mRNA poliadenilado.

5. Caudas MYC e HIS após o sítio de clonagem.

6. Possui gene para resistência a Ampicilina.

7. Possui gene para resistência a Neomicina controlado pelo promotor viral de SV40 e sítio de poliadenilação.

8. Possui origem de replicação bacteriana F1.

Considerando as características do vetor acima, assinale a afirmativa correta.

(a)

O vetor é ideal para produção de proteínas em bactérias, pois possui um promotor de citomegalovírus antes do local de clonagem (MCS). Além disso, o gene de interesse pode ser produzido com uma cauda MYC e HIS, possibilitando o isolamento da proteína de fusão de interesse após crescimento de bactérias contendo o vetor.

(b)

O vetor é ideal para produção de proteína de fusão em bactéria, pois possui dois genes para resistência a antibióticos o que permite a seleção de bactérias contendo o plasmídio com gene de interesse clonado.

(c)

O vetor é ideal, pois permite a produção de uma proteína de fusão em células de mamífero cuja maquinaria celular reconhece o promotor CMV e os sinais de poliadenilação. O vetor também permite a seleção de células transfectadas de forma estável, que serão resistentes à neomicina.

(d)

O vetor é ideal, pois permite a produção de uma proteína de fusão em células de mamífero, pois este vetor possui uma origem de replicação F1 o que permite que ele se replique e assim várias cópias dele são produzidas e transcritas nas células de mamífero.

(e)

O vetor é ideal porque permite a produção de uma proteína de fusão em células procariotas e em células eucariotas, pois todos os sinais de poliadenilação e todos os promotores que este vetor possui funcionam tanto em células procariotas quanto em células eucariotas.