Na amostra inicial (anterior à primeira transfusão), o grupo sanguíneo ABO deverá ser determinado pela classificação direta, sem necessitar realizar a classificação reversa. O antígeno Rh(D) deve ser determinado, empregando reagente anti-D em paralelo com sorocontrole Rh do mesmo fabricante. Se a reação for negativa para a presença do antígeno D, deve ser efetuada técnica para a exclusão de RhD fraco.

Se as hemácias selecionadas para transfusão não são do grupo O, deve ser investigada, no soro ou plasma do neonato, a presença de anti-A ou anti-B, com métodos que incluam a fase de antiglobulina humana. Este teste não precisa ser realizado se houver disponibilidade de uma amostra do sangue da mãe para tipificação ABO e Rh e se o grupo ABO da mãe for o mesmo do recém-nascido. Se ocorrer detecção da presença de anti-A ou anti-B, devem ser transfundidos glóbulos vermelhos do grupo O até que o anticorpo deixe de ser demonstrável no soro do neonato. Essas unidades não necessitam ser compatibilizadas.

Na amostra inicial (anterior a primeira transfusão), deve ser realizada a pesquisa de anticorpos irregulares. O método para detecção do(s) anticorpo(s) irregular(es) no soro ou plasma deve ser capaz de detectar anticorpos clinicamente significativos. Deve ser empregado soro do neonato ou da mãe.

Se a pesquisa de anticorpos irregulares for negativa, não será necessário compatibilizar as hemácias para a primeira transfusão nem para as transfusões subsequentes dentro do período neonatal, desde que as hemácias sejam do grupo "O". Se a pesquisa de anticorpos irregulares demonstrar a presença de anticorpos clinicamente significativos, a transfusão deve ser feita com unidades que não contenham os antígenos correspondentes. Essas unidades não necessitam ser compatibilizadas.