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O processo de retirada de água do interior da célula, para conseguir a infiltração suficiente da parafina, é denominado diafanização e utiliza, usualmente, álcool etílico em uma série crescente de concentração que inicia em 10% até chegar a 100%.
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A base para uma boa preparação histológica é a fixação completa e adequada do tecido a estudar. O uso de fixadores se faz necessário para manter a integridade dos tecidos após a morte, sem qualquer alteração da estrutura celular. O fixador deve, principalmente, inibir ou parar a autólise celular e impedir a atividade e proliferação bacteriana.
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O único grupo de vertebrados em que a preservação em via úmida é impossível são os mamíferos.
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A preservação em álcool 70%, de maneira geral, aplica-se a animais sujeitos a fácil decomposição ou em casos em que a preservação a seco é indesejável por alterar as características taxonômicas, como a coloração do animal, que é mantida na via úmida.
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No caso da fixação úmida de vertebrados, exceto para animais muito pequenos, cuja imersão em álcool 70% garantirá a preservação, os demais devem receber injeções de fixadores como o formol 10% antes da imersão em álcool. Em linhas gerais, injeta-se o fixador no sistema arterial, nas cavidades torácica e abdominal, assim como nas grandes massas musculares.
