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Analise as afirmativas abaixo em relação às características das culturas primárias e linhagens permanentes.
I. Culturas primárias podem permanecer em divisão por um longo tempo, porém o número de divisões é sempre finito.
II. A obtenção de uma linhagem permanente pode acontecer a partir de uma modificação que aconteça aleatoriamente em uma ou poucas células presentes em uma cultura, dando-lhe(s) a característica de proliferação indefinida. Alternativamente, esta característica pode ser obtida a partir da transformação das células primárias por exemplo por infecção por vírus carcinogênico.
III. As culturas primárias normais sempre darão origem naturalmente à linhagens celulares permanentes ou contínuas.
Assinale:
I. Culturas primárias podem permanecer em divisão por um longo tempo, porém o número de divisões é sempre finito.
II. A obtenção de uma linhagem permanente pode acontecer a partir de uma modificação que aconteça aleatoriamente em uma ou poucas células presentes em uma cultura, dando-lhe(s) a característica de proliferação indefinida. Alternativamente, esta característica pode ser obtida a partir da transformação das células primárias por exemplo por infecção por vírus carcinogênico.
III. As culturas primárias normais sempre darão origem naturalmente à linhagens celulares permanentes ou contínuas.
Assinale:
A fim de garantir a homogeneidade e a reprodutibilidade da experimentação envolvendo culturas celulares, é necessário que, antes da utilização de células para montagem de experimentos, seja realizada a contagem das mesmas. Todas as afirmativas abaixo se relacionam ao procedimento correto de contagem e ao cálculo do número de células em uma suspensão, exceto uma. Assinale-a.
O subcultivo da maioria das células aderentes envolve a utilização da protease tripsina e do sal EDTA. Sobre o motivo da utilização destes reagentes no procedimento de subcultivo celular, analise as afirmativas a seguir.
I. As células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas as outras pelas proteínas que compõe a matriz extracelular. Enquanto a tripsina reconhece e cliva regiões nativas destas proteínas, a função do EDTA é quelar os íons Ca2+, que são requeridos para a ligação célula-célula mediada pelas caderinas. Desta forma, tanto o EDTA quanto a tripsina servirão para promover o destacamento das células do frasco de cultivo e sua separação.
II. As células são cultivadas geralmente na presença de soro que fornece fatores de crescimento necessários para a divisão celular. A fim de realizar o subcultivo é necessário eliminar o soro presente no meio. A tripsina irá clivar as proteínas do soro e o EDTA facilitará a formação de agregados protéicos que serão facilmente removidos ao se descartar este meio, promovendo assim a retirada do soro do meio de cultivo.
III. As células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas as outras através das proteínas que compõe a matriz extracelular. A tripsina reconhece e cliva regiões nativas destas proteínas e a função do EDTA é servir de co-fator para a tripsina aumentando sua atividade. Desta forma, promovendo o destacamento das células do frasco de cultivo e sua separação.
Assinale:
I. As células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas as outras pelas proteínas que compõe a matriz extracelular. Enquanto a tripsina reconhece e cliva regiões nativas destas proteínas, a função do EDTA é quelar os íons Ca2+, que são requeridos para a ligação célula-célula mediada pelas caderinas. Desta forma, tanto o EDTA quanto a tripsina servirão para promover o destacamento das células do frasco de cultivo e sua separação.
II. As células são cultivadas geralmente na presença de soro que fornece fatores de crescimento necessários para a divisão celular. A fim de realizar o subcultivo é necessário eliminar o soro presente no meio. A tripsina irá clivar as proteínas do soro e o EDTA facilitará a formação de agregados protéicos que serão facilmente removidos ao se descartar este meio, promovendo assim a retirada do soro do meio de cultivo.
III. As células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas as outras através das proteínas que compõe a matriz extracelular. A tripsina reconhece e cliva regiões nativas destas proteínas e a função do EDTA é servir de co-fator para a tripsina aumentando sua atividade. Desta forma, promovendo o destacamento das células do frasco de cultivo e sua separação.
Assinale:
O crescimento de células de origem animal em um meio nutricional completo é usualmente ótimo quando o meio é tamponado em uma faixa de pH entre 7,2 a 7,4. Vários tampões podem ser utilizados para este fim, sendo que os que funcionarão de forma mais eficiente são aqueles cujo pKa está o mais próximo possível da faixa de pH requerida. Dentre os tampões descritos abaixo que podem ser comumente utilizados em cultivo de células animais, assinale aquele em que um dos componentes do sistema de tamponamento está em fase gasosa.
