CD4 e CD8 são receptores de membrana associados à caracterização de linfócitos T do sistema imunológico. A contagem de células expressando CD4 (CD4 positivas) é um dos parâmetros analisados em pacientes HIV positivos, visto que o HIV infecta estas células. A contagem de células CD4 positivas é comumente obtida através de citometria de fluxo. Desta forma, o número reduzido de células CD4 positivas é um dos preditores para que o paciente entre no protocolo de tratamento utilizando anti-retrovirais contra HIV. Avalie os gráficos (dot plot) analisados por citometria de fluxo provenientes de dois pacientes HIV positivos (A e B) com diferentes números de contagem de células CD4 positivas.



Assinale a alternativa correta.

Sobre os programas de aquisição e análise de dados gerados por citometria de fluxo, assinale a alternativa correta.

Sobre o funcionamento e a operação do citômetro de fluxo, analise as afirmativas a seguir.

I. Remova as bolhas das célula de fluxo. Para isto, o fluxo de solução salina primeiramente é interrompido e a pressão revertida retirando toda a solução salina da célula do fluxo e encaminhada para o descarte. Após o esvaziamento, o sistema preenche automaticamente a célula de fluxo com solução salina em velocidade controlada para evitar a formação de bolhas.

II. Sempre limpe o instrumento antes de desligá-lo ao final da corrida. Para prevenir que o tubo de injeção da amostra fique obstruído ou, para retirar resíduos de corantes, é necessário passar hipoclorito (0,5 a 1%) seguido de água destilada pelo sistema.

III. Realize procedimentos de controle de qualidade do equipamento como a calibração utilizando partículas (beads) marcadas com diferentes fluoróforos para a validação de protocolos envolvendo análises de diferentes fluorescências, além de testes de sensibilidade dos detectores envolvidos na percepção das fluorescências, sensibilidade dos detectores de side scatter (dispersão lateral) e forward scatter (dispersão frontal).

Assinale:

Sobre as diversas aplicações dos citômetros de fluxo, assinale a alternativa incorreta.

Sobre os sistemas básicos de um citômetro de fluxo, analise as afirmativas a seguir.

I. O sistema de fluidos é responsável pela condução ordenada de células ou partículas através de um fluxo contínuo, até que elas interceptem os feixes de laser. A ordenação é garantida pelo princípio da focalização isoelétrica, por meio da pressão exercida pelo fluido de condução da amostra até o recipiente de descarte.

II. O sistema ótico é composto por diferentes componentes de excitação (lasers, prismas e lentes) e de coleta (lentes, espelhos, filtros e fotodetectores). Os espelhos dicróicos e os filtros podem ser de três diferentes tipos: curta passagem (short pass), longa passagem (long pass) ou de passagem específica (band pass). Os filtros e espelhos de curta passagem permitem a passagem de luz com comprimento de ondas maiores ou iguais ao comprimento de onda especificado. No entanto, os filtros de longa passagem permitem a passagem de luz com comprimentos de ondas inferiores ou iguais aos especificados.

III. O sistema elétrico é composto de detectores que convertem os sinais luminosos em sinais elétricos gerando pulsos de voltagens. O pulso atinge intensidade máxima quando a partícula ou célula está totalmente inserida no feixe de laser.

Assinale: