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Para a realização de coleta de sangue, em tubos plásticos, a CLSI é indicada a seguinte sequência: 1 - Frascos para hemocultura.2 - Tubos com citrato (tampa azul-claro).3 - Tubos para soro com ativador de coágulo, com ou sem gel separador (tampa vermelha ou amarela).4 - Tubos com heparina com ou sem gel separador de plasma (tampa verde).5 - Tubos com EDTA (tampa roxa).6 - Tubos com fluoreto (tampa cinza).
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Para a realização da contagem de reticulócitos, em esfregaço sanguíneo, deve-se incubar amostra de sangue total, com o corante vital panótico, por 45 minutos, a 56°C.
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O esfregaço sanguíneo deve ser corado, após sua fixação e secagem, em lâmina de vidro. Para a realização dessa coloração, utilizam-se corantes que apresentam afinidade por diferentes regiões das células, segundo princípios químicos. Dessa maneira, corantes ácidos pigmentam regiões acidófilas e corantes básicos pigmentam regiões basófilas.
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A coleta de sangue, para a realização do hemograma, deve ser realizada em tubos de tampa roxa, contendo como anticoagulante o etilenedinitrilotetraacetato (EDTA). Porém pacientes que apresentam pseudotrombocitopenia induzida pelo EDTA, devido à aglutinação de plaquetas e satelitismo plaquetário, devem ter a contagem de plaquetas realizada consecutivamente à coleta, em tubos de tampa azul com anticoagulante citrato de sódio.
De acordo com a padronização dos protocolos laboratoriais, todos os tubos para coleta sanguínea identificados por suas características, incluindo cor da tampa e aditivos, deverão ser trocados ou preenchidos conforme a necessidade, obedecendo à seguinte ordem de coleta, ou seja, iniciando a sequência da esquerda para direita desta forma: