Questões de Concurso

Se você, hipoteticamente, quisesse construir um plasmídio contendo um gene para a produção em larga escala de uma proteína do vírus da dengue em bactérias você teria que adicionar uma seqüência que permita a ligação de ribossomos no mRNA transcrito permitindo assim que este gene seja traduzido no sistema heterólogo da bactéria. Esta seqüência é denominada sequência:

A dengue atualmente é a mais importante doença viral transmitida por mosquitos nos países tropicais e subtropicais atingindo pelo menos 100 milhões de indivíduos a cada ano. A doença é causada um dos quatro sorotipos do vírus da dengue (DENV-1, 2, 3, 4). Ainda não existe disponível uma vacina ou drogas antivirais específicas para o controle da infecção por DEN. O diagnóstico desta doença se baseia na detecção de anticorpos presentes no soro de indivíduos infectados. Em laboratório, podem ser produzidos antígenos recombinantes em bactérias. Imagine que dois antígenos recombinantes tenham sido produzidos: o antígeno X correspondendo à porção amino-terminal do envelope do vírus e o antígeno Y correspondente a um pedaço de NS5, purificados por cromatografia e utilizados em ensaios de ELISA. Abaixo estão descritos os resultados de reatividade cruzada obtidos quando estes antígenos foram incubados com soro de pacientes sabidamente diagnosticados para vírus DENV 1, DENV 2 e DENV 3.

Baseados nestes resultados podemos afirmar que:

A clonagem pelo método de shotgun se diferencia da metodologia convencional de clonagem pois:

A técnica de Chromossome walking é utilizada com a finalidade de:

Você conseguiu, por técnicas de DNA recombinante, expressar a proteína E do vírus da dengue em bactérias. Esta proteína estava fusionada a GST. Após lise das bactérias, você utilizou uma coluna para isolar a proteína de fusão do resto do material bacteriano. Para a eluição das proteínas de fusão você utilizou glutationa reduzida. De posse deste material, você imunizou três animais: Coelho I foi inoculado com a proteína fusionada, o Coelho II com a proteína produzida sem a porção GST e o Coelho III somente com GST. Após recuperar o soro dos três animais, você fez experimentos para testar estes três soros contra os três antígenos utilizados.

Os resultados de blots são mostrados abaixo:

Com base nestes resultados, é correto afirmar que: