Para a realização de PCR diagnóstico, utiliza-se frequentemente iniciadores degenerados ou contendo inosina como base nitrogenada a fim de maximizar a chance de detecção em amostras clínicas do ácido nucléico de patógenos que apresentem alta taxa de polimorfismos. Sobre o tema, analise as afirmativas a seguir.

I. Iniciadores degenerados são misturas de oligonucleotídeos apresentando diferenças nos nucleotídeos em várias posições.

II. A inosina é uma base que pareia somente com adenina e timina.

III. Não é possível sintetizar iniciadores degenerados e que, ao mesmo tempo, contenham inosina.

Assinale:

O estabelecimento de uma reação de PCR para o diagnóstico molecular de agentes infecciosos a partir de amostras biológicas muitas vezes apresenta como maior dificuldade a amplificação específica do fragmento genômico do patógeno de interesse. As afirmativas a seguir enumeram possibilidades para aumentar a especificidade da reação.

I. Aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação de PCR.

II. Aumento da concentração da DNA polimerase na reação de PCR.

III. Realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested), utilizando par de iniciadores mais externos à região de interesse na primeira reação, seguido da utilização de par de iniciadores mais internos.

Assinale:

Assinale a alternativa incorreta.

Em relação aos métodos sorológicos de diagnóstico, assinale a alternativa incorreta.

Um pesquisador desenvolveu um teste ELISA para a detecção de anticorpos anti-HIV a fim de ser utilizado como teste diagnóstico para esta infecção. Com o intuito de verificar a sensibilidade e a especificidade de seu novo teste, o pesquisador utilizou um banco de soros sabidamente positivos para a presença de anticorpos anti-HIV (1.000 soros) e um banco de soros sabidamente negativos para a presença de anticorpos anti-HIV (1.000 soros). Seus resultados foram: dos 1000 soros positivos seu teste detectou 920 positivos; dos 1000 soros negativos seu teste detectou 1 positivo. Sobre esses resultados, analise as afirmativas abaixo.

I. Pode-se dizer que com este novo teste houve um número de 80 resultados falso-positivos e um resultado falso-negativo.

II. Define-se sensibilidade como a percentagem dos resultados que serão negativos quando o anticorpo testado não estiver presente.

III. Um ensaio pouco sensível significa que haverá a detecção de um grande número de falso-negativos.

Assinale: